? ? ??會(huì)上，甘肅省領(lǐng)軍人才、慶陽市人民醫(yī)院主任檢驗(yàn)師侯娟娟主任為我們分享了【百日咳: 被忽略下的悄然復(fù)現(xiàn)】主題。

百日咳是由百日咳鮑特桿菌引起的急性呼吸道傳染病，主要通過飛沫傳播，傳染性強(qiáng)。最新的臨床癥狀為慢性咳嗽，如未得到及時(shí)有效治療，病程可達(dá)數(shù)個(gè)月。且有較嚴(yán)重的并發(fā)癥，如肺炎、百日咳腦病、心血管系統(tǒng)障礙、營養(yǎng)不良等。“百日咳再現(xiàn)”在我國已經(jīng)出現(xiàn)，在百日咳疫情高發(fā)的同時(shí)其流行病學(xué)特征發(fā)生改變，高危人群和傳播模式已經(jīng)與傳統(tǒng)百日咳相差甚遠(yuǎn)。

百日咳再現(xiàn)及危害

? ? ? 根據(jù)國家衛(wèi)生計(jì)生委疾病預(yù)防控制局公布的疫情報(bào)告顯示，2014-2018年，我國百日咳發(fā)病率逐年升高，在新生兒廣泛常規(guī)接種百白破疫苗的情況下，發(fā)病率依然從2014年的0.5/105暴漲到2018年的1.6/105。此外我國百日咳還呈現(xiàn)年長兒和成人的發(fā)病率上升，成為主要傳染源、出現(xiàn)局部地區(qū)爆發(fā)、出現(xiàn)新臨床特征等情況，2005-2014年天津診斷百日咳病例882例，其中成年人252例，占發(fā)病人數(shù)的28.57%。2005-2008年無成年人病例的報(bào)告；2009年為5.26%；隨后逐年增加，到2013年發(fā)病率達(dá)到最高的44.09%。后五年成年人發(fā)病構(gòu)成比前五年上升了26倍。發(fā)病人群年齡分布中，21-30年齡段占比最高，為36.12%。

*中國2011_2017年百日咳流行病學(xué)特征分析. 中國疫苗和免疫. 2018

? ? ??我國正面臨著“百日咳再現(xiàn)”問題的嚴(yán)峻考驗(yàn)，近年來國內(nèi)一些省份也陸續(xù)出現(xiàn)百日咳疫情大幅上升，引起各方高度關(guān)注，百日咳現(xiàn)已經(jīng)成為臨床醫(yī)師廣泛關(guān)注的傳染性疾病。百日咳鮑特桿菌引起的早期呼吸道感染癥狀在臨床表現(xiàn)方面與其他呼吸道病原體引起的呼吸道疾病較為類似，因此需要有效的診斷方法能快速地鑒定百日咳鮑特桿菌，有助于流行病學(xué)現(xiàn)場處置。

? ? ??目前臨床上常用細(xì)菌培養(yǎng)和血清學(xué)篩查等方法對(duì)百日咳桿菌進(jìn)行檢測，但百日咳桿菌分離培養(yǎng)難度大，培養(yǎng)周期長，而血清學(xué)篩查存在靈敏性低，特異性不高的缺陷，限制了上述兩種百日咳桿菌檢測方法在臨床上的應(yīng)用。

本項(xiàng)目通過核酸檢測的方法快速地鑒定樣本中的百日咳鮑特桿菌，是《中國兒童百日咳診斷及治療建議》中推薦的百日咳桿菌的有效診斷方法，有助于實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)診斷，為后續(xù)的藥物治療提供診斷依據(jù)指導(dǎo)精準(zhǔn)用藥，并且有利于流行病學(xué)的處置。

《中國兒童百日咳診斷及治療建議》中指出的百日咳的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)：

IS481引物

無法特異性檢測百日咳

億立方應(yīng)用生物信息學(xué)方法

設(shè)計(jì)出特異針對(duì)百日咳的引物

? ? ??①應(yīng)用生物信息學(xué)方法服務(wù)器計(jì)算，對(duì)比NCBI數(shù)據(jù)庫中所有2萬多條百日咳序列設(shè)計(jì)引物探針，100%匹配能檢出。傳統(tǒng)引物設(shè)計(jì)選擇有限的代表序列，包容性和特異性不足。

? ? ??②所選擇的檢測靶標(biāo)為高拷貝數(shù)靶標(biāo)（其在百日咳基因組中的拷貝數(shù)為15-18個(gè)），提高了檢測的靈敏度，最低檢測限達(dá)到200 copies/mL。

百日咳核酸檢測的必要性

? ? ??百日咳是一種可以治愈的疾病,患者的預(yù)后通常較好。然而,準(zhǔn)確的病情診斷是控制百日咳傳播的關(guān)鍵,特別是疾病早期的判斷。百日咳的實(shí)驗(yàn)室檢測易受標(biāo)本采集、采樣時(shí)間、疫苗接種史和抗生素使用等因素的影響,百日咳桿菌難以培養(yǎng)且培養(yǎng)周期較長,血清學(xué)檢測的靈敏度和特異性也不高。相比之下,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)作為診斷百日咳感染的敏感方法,可以實(shí)現(xiàn)疾病的及早發(fā)現(xiàn)、診斷和治療,顯著提高患者的生活質(zhì)量。

? ? ??深圳市億立方生物技術(shù)有限公司的百日咳桿菌核酸檢測試劑盒具有更高的靈敏性，理論上能檢測出一個(gè)拷貝的病原體，更適合于早期病程患兒病情診斷；針對(duì)百日咳特異性序列設(shè)計(jì)引物探針，與血清學(xué)檢驗(yàn)所用的抗原片段相比，具有更高的特異性，能提高檢測的特異性；可擴(kuò)大檢測人群范圍，對(duì)免疫缺陷者的檢測成為可能。血清學(xué)篩查存在靈敏性低，特異性不高的缺陷，百日咳桿菌核酸檢測更適用于臨床大規(guī)模篩查。

? ? ??該產(chǎn)品適用于檢測人口咽拭子或鼻咽拭子樣本中的百日咳桿菌DNA，是全國首個(gè)獲批第三類醫(yī)療器械注冊(cè)證的產(chǎn)品，目前已廣泛應(yīng)用于全國各大醫(yī)院。

? ? ??采用臨床廣為接受并且穩(wěn)定實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，以百日咳桿菌基因組DNA高度保守區(qū)為靶區(qū)域進(jìn)行基因檢測，反應(yīng)體系靈活多變，檢測不受樣本數(shù)量的限制，可同時(shí)完成多個(gè)樣本檢測，操作簡單，檢測試劑中包含核酸提取試劑，核酸提取后進(jìn)行PCR反應(yīng)，PCR反應(yīng)體系中含有dU-UNG酶防污染體系和陰陽質(zhì)控品，以避免假陽性和假陰性結(jié)果。

百日咳多中心

? ? ??我國人口基數(shù)大，百日咳實(shí)際發(fā)病數(shù)遠(yuǎn)高于報(bào)告數(shù)，且公共衛(wèi)生意識(shí)不足，成人感染不重視且沒有成人疫苗，為進(jìn)一步完善、規(guī)范、和解決百日咳患者臨床實(shí)驗(yàn)室診斷中的難點(diǎn)問題，提高醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)百日咳診療能力，保障人民生命健康，根據(jù)中國婦幼保健院協(xié)會(huì)《關(guān)于發(fā)布“百日咳桿菌核酸檢測在婦兒領(lǐng)域應(yīng)用的多中心研究”項(xiàng)目研究方案的通知》（中婦幼便函[2021]281號(hào)）文件要求。

? ? ??億立方將不斷憑借自身的優(yōu)勢，繼續(xù)做敢于開拓創(chuàng)新、有責(zé)任擔(dān)當(dāng)?shù)母咝录夹g(shù)企業(yè)，為落實(shí)健康中國建設(shè)添磚加瓦。

? ? ??億立方人定會(huì)不負(fù)期待，繼續(xù)以自我創(chuàng)新為核心推動(dòng)力，努力進(jìn)取，力爭做分子診斷先進(jìn)技術(shù)的領(lǐng)軍企業(yè)。